METODICA DEL SOUTHERN BLOTTING

Un frammento di restrizione derivato da una molecola di DNA e contenente una sequenza specifica di base, puņ essere identificato mediante ibridizzazione con cDNA.

La tecnica si attua separando una miscela di frammenti di restrizione mediante elettroforesi sul gel di agarosio, si procede a denaturazione del DNA per ottenere filamenti singoli e lo si trasferisce su filtri di nitrocellulosa. I frammenti mantengono sulla nitrocellulosa le stesse posizioni che avevano su gel, posizioni che possono essere determinate ibridizzando il DNA su filtro con una sonda di DNA a singolo filamento con P32. L’autoradiografia rivela quindi la posizione del frammento di restrizione che ha una sequenza complementare. Attraverso questa tecnica, si puņ identificare un frammento in mezzo a milioni di altri.

La tecnica analoga per l’analisi dell’RNA č stata chiamata Northern blotting.

 DNA COMPLEMENTARE

 METODO DEI DIDEOSSI DI SANGER

 PCR e SUOI USI

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